关于平末端DNA加A的一些问题~刚刚学做克隆,看到网上有两种平末端DNA加A尾方法,一种是切胶回收后加,另一种是直接加在PCR产物中,想请问:1.第二种加A方法,加Taq酶和dNTPs了,还要不要加buffer~2.

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/29 16:33:16
关于平末端DNA加A的一些问题~刚刚学做克隆,看到网上有两种平末端DNA加A尾方法,一种是切胶回收后加,另一种是直接加在PCR产物中,想请问:1.第二种加A方法,加Taq酶和dNTPs了,还要不要加buffer~2.

关于平末端DNA加A的一些问题~刚刚学做克隆,看到网上有两种平末端DNA加A尾方法,一种是切胶回收后加,另一种是直接加在PCR产物中,想请问:1.第二种加A方法,加Taq酶和dNTPs了,还要不要加buffer~2.
关于平末端DNA加A的一些问题~
刚刚学做克隆,看到网上有两种平末端DNA加A尾方法,一种是切胶回收后加,另一种是直接加在PCR产物中,想请问:
1.第二种加A方法,加Taq酶和dNTPs了,还要不要加buffer~
2.是在PCR 72度延伸时暂停加效果好,还是PCR后,再加效果好~
3.如何鉴定是不是加A尾成功了?有没什么方法做个阳性对照?
4.要不要加A尾成功了,再进行一次纯化,然后再连接载体呢?

关于平末端DNA加A的一些问题~刚刚学做克隆,看到网上有两种平末端DNA加A尾方法,一种是切胶回收后加,另一种是直接加在PCR产物中,想请问:1.第二种加A方法,加Taq酶和dNTPs了,还要不要加buffer~2.
是一个人的问题么.
你这个平末端DNA是怎么得到?如果是PCR得到的话就表示用的酶带有外切酶活性,如果不回收一下的话再加A还是会被切掉的 如果是直接拿到的一个平末端DNA片段那就可以用第二种方法了 不过还是要加buffer,就相当于做一次PCR,不过只要最后的延伸那步而已 鉴别加A成功就是连T载体了,最好还是纯化,这个又不麻烦

关于平末端DNA加A的一些问题~刚刚学做克隆,看到网上有两种平末端DNA加A尾方法,一种是切胶回收后加,另一种是直接加在PCR产物中,想请问:1.第二种加A方法,加Taq酶和dNTPs了,还要不要加buffer~2. 刚刚学做克隆,看到网上有两种平末端DNA加A尾方法,一种是切胶回收后加,另一种是直接加在PCR产物中,想请问:1.第二种加A方法,加Taq酶和dNTPs了,还要不要加buffer~2.是在PCR 72度延伸时暂停加效果 PCR加A的问题做PCR时,3`末端加几个A? 实验室用博凌科为的平末端DNA加A试剂盒怎么样?那位老师用过这个? 关于DNA复制前导链5‘末端引物被切除之后如何被补齐的问题? DNA连接酶的问题简要的说,DNA连接酶有没有专一性?不同黏性末端或者平末端是否能够用同一种DNA连接酶? 什么是线形DNA的末端问题?其解决方法是什么? 最近刚刚学圆周率,要一些基本的问题,稍微难点,5题,周一前要, 关于小型环状DNA,DNA连接酶催化互补的粘性末端,碱基之间形成氢键吗 限制酶问题限制酶切割两种末端 粘性末端和平末端,用DNA连接酶连接的两个末端,两个末端必须是相同的 这句话是什么意思? 关于开方,平方根的一些问题~刚刚学了开方~1.根号a(a是无理数~像7啊3啊,开不了方的~)的平方根是什么?2.根号a(a也是无理数.)的算术方根是不是根号a?如果它开不了方时?反正就是这两个问题`~对 关于pfu酶扩增PCR产物在做PCR时,用pfu聚合酶扩增出来的产物都是平末端的吗?就是说不管引物序列5'端加的的酶切位点是平末端的还是粘性末端的,只要是用pfu聚合酶扩增出来,那么产物都是平末 DNA粘性末端或平头末端是怎样子的? 具有3'到5‘外切活性DNA聚合酶的PCR产物不能用末端加A尾活性连到T载体上吗 如何在DNA平头末端上加A为确保高保真性不加Taq酶 DNA分子的黏性末端是什么? 切割后DNA产生的末端有 Taq DNA聚合酶问题Taq DNA聚合酶具有扩增效率高和错配率低的优良性能,使用该产品扩增得到的PCR产物的3’末端附有一个'A'碱基,请问如何产生的?