作业帮关于原核表达基因测序问题原核表达基因克隆时,为什么非要先克隆到中间载体上测序,而不是直接到表达载体,拿表达载体测序呢?希望大侠们不吝赐教啊!
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/03 17:47:30
关于原核表达基因测序问题原核表达基因克隆时,为什么非要先克隆到中间载体上测序,而不是直接到表达载体,拿表达载体测序呢?希望大侠们不吝赐教啊!
关于原核表达基因测序问题
原核表达基因克隆时,为什么非要先克隆到中间载体上测序,而不是直接到表达载体,拿表达载体测序呢?希望大侠们不吝赐教啊!
关于原核表达基因测序问题原核表达基因克隆时,为什么非要先克隆到中间载体上测序,而不是直接到表达载体,拿表达载体测序呢?希望大侠们不吝赐教啊!
其实简单一点,可以直接克隆到表达载体上,送去测序确定之后再表达；我们以前一直这么做的；但是有些情况下,比如表达载体不是诱导型的,或者表达的蛋白对大肠杆菌宿主菌毒性很大,影响菌的生长,导致菌生长困难、提质粒困难等等,就会先克隆到一个克隆载体上面,做测序确定；然后再克隆到表达载体上.
通常来说我不太喜欢做两次克隆,总是酶切转化筛选；我喜欢选控制比较严谨的可调控性原核表达载体,比如pET系列的多个载体,直接把目的基因克隆上去.
每一步都是在确定你的基因是否正确。简单地说，如果你最后没有表达，问题出在哪一步就很难确定，只有在前面每一步都确定后，才不用最后走弯路。
如果该基因表达不影响表达载体的生长，是可以一步直接转入表达载体的。但是表达载体不宜作为质粒长期保存载体。
关于原核表达基因测序问题原核表达基因克隆时,为什么非要先克隆到中间载体上测序,而不是直接到表达载体,拿表达载体测序呢?希望大侠们不吝赐教啊!
基因原核表达的详细过程
简述原核基因表达调控?
阐述原核生物基因表达调控途径
说明原核生物基因表达调控的特点?
pet载体原核表达基因的终止密码子要加吗
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如何使基因在原核生物中表达
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原核基因转录调控的特点是原核基因表达调控的特点,不是基因的特点
原核基因在大肠中表达存在密码子偏爱性吗?我在做芽孢杆菌一个蛋白的异源表达,基因克隆了,用的pET-28a,表达菌株是BL21(DE3)pLysS,测序也没有问题,25℃、30℃、37℃都诱导了,IPTG为0.5mM.可就是不
请问：真核生物的基因在原核生物基因进行表达时的注意事项 有哪些?
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