作业帮PCR的合成原理
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/03 09:51:14
PCR的合成原理
PCR的合成原理
PCR的合成原理
①模板DNA的变性：模板DNA经加热至94℃左右一定时 聚合酶链式反应间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后,温度降至40~60℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在DNA聚合酶的作用下,于72℃左右,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板.每完成一个循环需2～4分钟,3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍.
简单的说 就是DNA的复制 你需要详细的过程么
纯粹手打
pcr通过pcr仪来实现dna的大量体外扩增
使用pcr仪首先要设计程序
一般有以下几个参数
1T=94度 00:04:00 94度预变性4分钟
2T=x xxxxxxxx x度变性x时间
3T=x xxxxxxxx x度退火x时间
4T=x xxxxxxxx x度延伸x时间
5go to 2 re...
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纯粹手打
pcr通过pcr仪来实现dna的大量体外扩增
使用pcr仪首先要设计程序
一般有以下几个参数
1T=94度 00:04:00 94度预变性4分钟
2T=x xxxxxxxx x度变性x时间
3T=x xxxxxxxx x度退火x时间
4T=x xxxxxxxx x度延伸x时间
5go to 2 rep x 从第二步开始循环x次
6T=x xxxxxxxx x度总延伸x时间
7hold 4度 4度保存
save yes
加入其中的关键酶taq 是非常好好的酶 因为他可在最高90多度还保持较高的活性 避免了 多次加入酶的问题 大幅度降低了成本
收起