作业帮PCR试验的步骤
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/03 03:48:04
PCR试验的步骤
PCR试验的步骤
PCR试验的步骤
标准的PCR过程分为三步（如图所示）：
1.DNA变性（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下,
氢键断裂,形成单链DNA
2.退火（复性）（40℃-65℃）：系统温度降低,引物与
DNA模板结合,形成局部双链.
3.延伸（68℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右最佳的活
性）的作用下,以dNTP为原料,从引物的5′端→3′ 端延
伸,合成与模板互补的DNA链.
每一循环经过变性、退火和延伸,DNA含量既增加一倍.
现在有些PCR因为扩增区很短,即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的时间内复制完成,因此可以改为两步法,即退火和延伸同时在60℃-65℃间进行,以减少一次升降温过程,提高了反应速度.
准备样品，PCR，跑胶检测
高温变性——低温退火——引物延伸