植物基因组已经提出来了,PCR一直没有p出来,我的引物是根据cDNA设计的,大恩不言谢植物基因组已经提出来了,PCR一直没有p出来,我的引物是根据cDNA设计的,问题可能是因为引物刚好选在两个外显

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/16 01:02:46
植物基因组已经提出来了,PCR一直没有p出来,我的引物是根据cDNA设计的,大恩不言谢植物基因组已经提出来了,PCR一直没有p出来,我的引物是根据cDNA设计的,问题可能是因为引物刚好选在两个外显

植物基因组已经提出来了,PCR一直没有p出来,我的引物是根据cDNA设计的,大恩不言谢植物基因组已经提出来了,PCR一直没有p出来,我的引物是根据cDNA设计的,问题可能是因为引物刚好选在两个外显
植物基因组已经提出来了,PCR一直没有p出来,我的引物是根据cDNA设计的,大恩不言谢
植物基因组已经提出来了,PCR一直没有p出来,我的引物是根据cDNA设计的,问题可能是因为引物刚好选在两个外显子之间,想问下是不是这个原因(别笑我问题很幼稚,我只是一个大三的),还有就是每次p时在最前面大概100bp左右都有很亮的片段,我是用超表达和cDNA的两対引物两两配对的,结果4个在最前面都有很亮的条带,也不拖尾,很漂亮,不知道那个是什么,有人说是引物二聚体,我不确定,

植物基因组已经提出来了,PCR一直没有p出来,我的引物是根据cDNA设计的,大恩不言谢植物基因组已经提出来了,PCR一直没有p出来,我的引物是根据cDNA设计的,问题可能是因为引物刚好选在两个外显
我想你可以从三个方面去找原因:
1.基因组的提取是不是真的没有错误.
2.引物的设计是不是正确,如果是选在两个外选子之间,那样会有特异的序列(外显子和内含子连接处序列有特异性)
3 PCR程序有没有优化,如果前面两点都没问题,那么你可以考虑做一下优化.
前面100bp一般都会是引物二聚体,你可以看看你设计的引物之间是不是互补性很强.

PCR不成功的原因非常地多,你试试PCR程序设置一下,退火温度调高些,加大模版的量

你的目的基因片段多长啊?我不知道多长,但是cDNA大概600bp左右那么,那个100bp的肯定是二聚体了。。。你试试把循环数提高5个循环吧,然后退火温度提高一些吧,最好设计一下几个温度一齐PCR,然后假设循环数20cycle,25cycle,30cycle,这样看看行不行。。。如果都不行的话,可能是引物问题了...

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你的目的基因片段多长啊?

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建议做RT-PCR

植物基因组已经提出来了,PCR一直没有p出来,我的引物是根据cDNA设计的,大恩不言谢植物基因组已经提出来了,PCR一直没有p出来,我的引物是根据cDNA设计的,问题可能是因为引物刚好选在两个外显 植物基因组pcr什么都没有我现在做到转基因筛选这一步了,已经提完植物基因组DNA,也设计好了引物,可什么都没p出来,不知道什么原因,是我根本就没转进去吗?可从蛋白水平检测是有差异的, 植物基因组DNA,PCR没有条带这是我提的植物基因组DNA ,PCR没有条带,帮我看看基因组提的有没有问题,怎么才PCR能出来呢 用takara的试剂盒提取大米和大豆的基因组,pcr之后跑电泳,但是电泳总是没结果,没条带.试剂盒应该没有问题,因为不久前还用,都提出来了.而且因为提不出来,就换了一个新的,结果还是提不出来, 我的目的基因目前只知道部分序列,现在需要克隆出这个基因全长来,我已经合成了RACE模板及引物,进行了PCR,一直没有出来目的条带 请问烟草的全基因组序列是不是都知道了,应该怎么查具体一个基因的序列呢?植物中有哪些物种的全基因组序列已经测出来了? 内生真菌分子鉴定,its1 its4引物序列我要做内生菌分子鉴定,DNA已经提出来了,下面怎么做,PCR要用的引物是是its1 its4吧?分别碱基序列是什么,还有P时候的条件设置,P完后可以直接送去测序吗,还是 PCR目的条带的问题,cDNA模板没有问题,因为我的actin能跑出来.可是我的目的条带一直扩不出来,换了引物还是不管用.用别人肯定扩出来的引物去P,还是没有目的条带.这是为什么啊? PCR无法P出目的条带最近在做PCR,提取的基因组为模板,基因组序列上从NCBI上找的,没有错.但是无论如何换引物和PCR条件,都会得到一条比目的片段大500bp左右的亮条带.(引物换了很多对儿,卡的 我做转基因植物,最近一直做PCR鉴定,但只有引物二聚体,原因会有哪些?转同样的基因,在转基因烟草的PCR鉴定时,能P出目的条带,而且我用的是相同的条件来做我的却得不到结果.会不会和物种有 以革兰氏阳性菌基因组为模板,目的片段500bp左右,体系为,模板1μL,dNTP 2μL,引物1μL,Taq 0.2μL退火温度是50°C,但是PCR后没有目的条带,只要二聚体,引物已经设计两次了,请问可能是什么问题? 转基因得到了转化苗,做PCR的时候,如果质粒P出了阳性 对照的基因组没有条带 是不是就能确定没转进去基因第一次做的时候,质粒是阳性的,样品有2个在目的片段那也出现了条带,但很暗,后来再 宇宙的边际是什么?为什么宇宙没有边际?其实这个问题已经有很多人问过了,也是很多人一直在争论的问题,只是我觉得都没有解释的很明白,所以在这里再次提出来.其实我是想借此机会发表一 RT-PCR只有引物二聚体而没有目的条带怎么办?我已经重新设置引物了 [求助] PCR产物条带很淡最近做的PCR一直条带很淡,已经调了一些条件,还是没有效果. 目前是这样的:目的片段大约2.5kb,退火温度55度,从电泳的结果看来目的条带很整齐,也没有非特异性扩增, 荧光定量PCR引物为什么要跨内含子设计,大家都说是为了避免提RNA时残留基因组的干扰,但是即使跨了内含子,假如有基因组残留,Real time PCR中还是能P出比cDNA大的一条带(含内含子的条带),探 我就要做荧光定量pcr了,模板已经准备好了,但是之前没有做过,想知道在做荧光定量pcr之前事先做些什么呢? 我家水表冻坏了 一直没有交水费 因为一直没有人在家  今天来查水表 把我电话留下来了 是不是要罚款?已经一年多没有交水费了 该怎么处理呢?