求助：DNA硅胶柱纯化,产率很低,究竟是为什么呢求助,我刚换了一个新实验室（实验室刚建起来）,一切都在摸条件中,做了几次胶纯化,DNA纯化纯度都不高,浓度也很低（之前的电泳都没问题,浓

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/03 18:16:23
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求助：DNA硅胶柱纯化,产率很低,究竟是为什么呢
求助,我刚换了一个新实验室（实验室刚建起来）,一切都在摸条件中,做了几次胶纯化,DNA纯化纯度都不高,浓度也很低（之前的电泳都没问题,浓度纯度都很高）（我的700bp的序列约在十几ng/ul,最高的也只是二十多一点,同实验室同学的大多都在十以下）,试剂盒用的康为世纪（cwbio）的胶纯化试剂盒和DNA纯化试剂盒,求问可能的原因……万分感谢……

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以我的经验,你的目的带700bp,应该是比较好回收的,以下几步需要注意：
1,切胶时,尽量切薄点,称重,按比例加入溶胶液；
2,乙醇洗涤后,务必离心去残余乙醇,可在50℃烘箱烘2分钟；
3,洗脱时,一般可以用ddH2O,但现在出了问题,建议你使用试剂盒自带的TE洗脱缓冲液,洗脱液体积可根据需要改动,如果想获得更多的绝对量就多加点,如果想获得更高浓度就少加点.
4,把洗脱液加入到柱子后,可以在50℃水浴中温育5分钟再离心.
我没用过这个试剂盒,问问别的使用这个牌子的实验室有没问题.有时,不同牌子的盒子差异挺大的.

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