克隆2500个碱基,该设计多长的引物呢?我准备克隆2500个碱基,引物是不是应该长一点?

克隆2500个碱基,该设计多长的引物呢?我准备克隆2500个碱基,引物是不是应该长一点? 克隆引物和表达时引物设计的区别 设计的引物19个碱基,其中包括6 bp的酶切位点和3个保护碱基,和模板配对的只有11个碱基,是不是太短?该引物用于基因.19个碱基的引物是不是肯定不能扩增出目的基因? 简并引物经PCR的产物是不是都需要经过克隆?我设计的是一对简并引物,测序后有4个位点出现重叠峰,是不是简并引物的PCR产物都会出现此现象?克隆后就能确定这4个重叠峰的碱基吗?我现在已经 如果要克隆一个基因,但你只知道它的同工酶的部分基因序列,该如何设计引物呢? 已知一个基因的mRNA和cDNA,我想克隆此基因,进行转染表达,但是设计的引物无法扩增出目的片段……急求!我目的片段大小为2800,载体为eGFP-N1,设计引物中,我是取了ATG开始的前20个左右的碱基,加 荧光定量PCR引物中含简并引物可以吗?设计荧光定量PCR引物时,保守片段中,上游引物有一个碱基不保守,下游引物有2个碱基不保守,因此在该位置设计为简并引物,不知道这样做可不可以?另外说 2个亲本测序后,发现部分位点有6个碱基的插入,如何设计引物进行多态性分析? PCR扩增目标基因,完全没有条带.是不是设计的引物太短?引物只有10个碱基和模板配对 设计引物要先对模板DNA测序吗?不测序的话又如何知道能设计出碱基互补的引物呢?设计引物是否就是对引物长度的设计?（因为模板是已经存在的,引物只能根据模板序列设计） 克隆设计引物插入酶切位点的问题我要对真菌的全序列进行克隆,设计引物时是不是讲酶切位点插入到5’端就可以了?加的保护基团在酶切位点之前加就可以吗,它是随便的三个碱基吗?限制性 设计引物扩增模板基因,引物中至少要有多少个碱基与模板配对?16个可以吗 PCR引物设计不好,如何提高引物特异性?设计的PCR引物都是80多分的样子,但是一旦加上酶切位点和保护碱基以后,引物的特异性就变得特别差,如何解决这种问题,有没有什么设计引物的技巧呢? 引物设计怎么加保护性碱基 如何设计real-time PCR 引物请问我想设计一个基因的引物,既能扩增人类也能扩增小鼠的该基因,该如何操作呢? PCR时引物的概念包括加进去的酶切位点和保护碱基嘛?算进引物的长度吗?一块分析嘛?我设计的下游引物只有15个碱基,但primer5上的长度18个,如果我删去三个就不配对了（只是下游引物）,影响 引物的设计原则t18载体和t18simple载体的酶切位点t18载体和t18simple载体的酶切位点,是不是可以做大部分基因的克隆载体呢? 2OD的引物怎么稀释?我要做RAPD,选的随机引物都是每条10个碱基的.上海生工的引物合成报告单上显示2OD/管,请问该怎么加灭菌水?