克隆设计引物插入酶切位点的问题我要对真菌的全序列进行克隆,设计引物时是不是讲酶切位点插入到5’端就可以了?加的保护基团在酶切位点之前加就可以吗,它是随便的三个碱基吗?限制性

克隆设计引物插入酶切位点的问题我要对真菌的全序列进行克隆,设计引物时是不是讲酶切位点插入到5’端就可以了?加的保护基团在酶切位点之前加就可以吗,它是随便的三个碱基吗?限制性 克隆引物和表达时引物设计的区别 关于通用测序引物的问题现在要克隆一段基因,设计引物时,上游加入HindⅢ酶切位点,下游加入KpnI酶切位点.师兄要求再设计一段通用测序引物,用来检测质粒重组时,目的基因片段是否连在质粒 克隆2500个碱基,该设计多长的引物呢?我准备克隆2500个碱基,引物是不是应该长一点? 我最近想设计茎环结构的引物克隆MicroRNA,但不知我发给引物公司的单链引物,在我试验时是自动形成茎环结构,还是要在引物合成后进行相关的处理才会形成茎环.此引物是做miRNA逆转录用的， 通过设计带酶切位点的PCR引物来使目的片段添加限制性酶切位点的原理是什么?百思不得其解,我的意思是说引物人为添加上的酶切位点与要扩增的片段也不匹配,怎么能随着引物克隆到目的片 我要克隆目的基因,可在其他物种还没研究,怎么设计引物啊?你是怎么解决的啊? 基因克隆的具体操作步骤是什么?我是学生物的,可是我对生物一窍不通,现在要做毕业试验了.题目是《高温灵菌红素产生菌的基因克隆与鉴定》.我的老师说引物序列已经设计好了,我的任务就 采用通用引物对插入到质粒克隆载体中的基因片段进行测序,t3 引物读出来的数据是该基因的5'端还是3'端?采用通用引物对插入到质粒载体(pBluScript)中的基因片段进行测序,t3 引物读出来的数据 PCR引物设计应该注意的问题? 如何设计特异性引物我没学过分子方面的理论知识,但是现在我想做一个真菌的分子检测,就想设计一对引物进行特异性检测.要与其他不同的参考菌株做检测,那是不是在我使用软件设计引物的 自己设计了一对引物克隆一段基因,PCR出不来结果可能是什么问题? PCR产物测序问题.我用简并引物扩增未知基因.设计了几对引物.都出现了目的条带.发现其中两对引物的产物长度比较长.因为我最终是要拿到这个未知基因的全长.我想选择最长的目的条带去测 引物设计 测序 PCR 探针测序,PCR,探针引物设计的不同?分别要注意哪些问题? 带酶切位点的引物设计问题带酶切位点的引物设计时计算Tm值,退火温度及GC含量时是否要把酶切位点和保护碱基计算在内?我觉得不用,因为酶切位点可以不用跟模板结合, 基因克隆中有关点突变引物设计问题我需要用引物设计点突变一段基因的3‘端几组氨基酸密码子（每次突变一个氨基酸密码子）,突变的密码子已确定,不能用密码子的兼并性,想请问一下各位 表达载体构建的问题.我要用PBI121做表达载体,用他上面的35S做启动子,那么我的插入目的基因的启动子是不是要和表达载体上的启动子在一个编码区,设计引物时要怎么设计才能让PBI121上的启动 引物设计区域选择问题.我设计兼并引物.多序列比对发现三个保守区.一个在中上游,一个在中游,一个在下游.有经验的朋友能告诉我我该选哪个保守区设计引物吗?设计多少对比较好?用来扩增